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揭秘冬虫夏草第一章 冬虫夏草概览

目录

 

第一章、冬虫夏草概览

一、冬虫夏草的概念

二、冬虫夏草的历史沿革

三、 虫草的种类和分布

四、冬虫夏草的分类地位

五、现代药典中的冬虫夏草

六、真假冬虫夏草的辨别

 

第二章、冬虫夏草

一、冬虫夏草的生态环境

二、冬虫夏草的分布

三、冬虫夏草的形成过程

四、冬虫夏草的形态特征

五、冬虫夏草的采收

 

第三章、冬虫夏草的生物学特性

一、冬虫夏草菌

二、冬虫夏草寄主昆虫

 

第四章、冬虫夏草的化学组成

一、虫草多糖

二、氨基酸类和肽类

三、糖醇、甾醇类

四、脂肪和脂肪酸

五、虫草素和生物碱

六、微量元素

七、其他成分

 

第五章、冬虫夏草的生物学功能及应用

一、冬虫夏草的生物学功能

二、冬虫夏草的应用

三、使用冬虫夏草后效果感知

四、冬虫夏草在使用过程中的注意事项

 

第六章、冬虫夏草菌种

一、菌种的分离

二、菌种的选育

三、菌种的培养

四、菌种的鉴定

五、菌种的保藏

 

第七章、冬虫夏草的人工栽培探索

一、冬虫夏草寄主的人工养殖

二、冬虫夏草菌对蝙蝠蛾幼虫的侵染

三、制约冬虫夏草人工栽培的因素

 

第八章、冬虫夏草无性型产品的开发应用

一、冬虫夏草无性型的液体深层发酵

二、冬虫夏草无性型的浅层、静止培养

 

第九章、甘肃天祝冬虫夏草无性型单孢子菌的鉴定

 

第十章、冬虫夏草无性型分离与免疫组化鉴定

 

  第十一章、冬虫夏草菌丝体水提取液诱导SP2/0细胞凋亡及对p53基因表达的影响

 

 

第十二章、冬虫夏草菌丝液诱导HepG2肝癌细胞凋亡作用与机制研究

 

 

第一章、冬虫夏草概览

 

 一、冬虫夏草的现代概念

 

冬虫夏草在我国自古以来就是名贵的中药材,具有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳、补肺益肾,止血化痰,秘精益气等多种功效,与人参、鹿茸一起统称中药三宝并位列三宝之首。

冬虫夏草名称的由来是源于科技不发达时代,古人对冬虫夏草形成过程的直接形象描述。根据冬虫夏草的形成过程,受真菌感染的幼虫,逐渐蠕动到距地表二至三厘米的地方,头上尾下而死,这就是冬虫。幼虫虽死,体内的真菌却日渐生长,直至充满整个虫体。来年春末夏初,虫子的头部长出一根紫红色的子实体, 高约二至五厘米,顶端有菠萝状的囊壳, 这就是夏草。实际上虫已不是虫,而是徒具虫状的冬虫夏草菌菌核,草也不是草,而仅是形态像草一样的子实体。

 

冬虫夏草的现代概念为:冬虫夏草(Ophiocordyceps Sinensis)是生长于青藏高原地区,由蝙蝠科昆虫蝙蝠蛾幼虫感染冬虫夏草真菌中国被毛孢后形成的子座及幼虫尸体的菌虫复合体。

 

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刚采挖出的去除膜皮的冬虫夏草
 

冬虫夏草子坐部分为中国被毛孢真菌的有性型,是进行有性繁殖的器官,如同常见的蘑菇;其虫体部分全部为中国被毛孢真菌的菌丝体所充满,此菌丝体部分为冬虫夏草中国被毛孢真菌的无性型,蝙蝠蛾幼虫不过是寄生阶段提供营养的载体。因此,冬虫夏草并不神奇,其本质就是中国被毛孢真菌。

现代生物学技术完全可寻找与蝙蝠蛾幼虫类似的培养基成分繁殖中国被毛孢真菌,人工开发出与天然冬虫夏草活性成分及生物学功能一致的冬虫夏草产品。

 

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天然冬虫夏草虫体为菌丝体充

 

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显微镜下的虫草虫体充满菌丝(20倍)
 
  

天然冬虫夏草具有三个特点:

①冬虫夏草真菌为中国被毛孢;

②冬虫夏草的寄主是虫草蝙蝠蛾幼虫;

③冬虫夏草生长于青藏高原海拔3000以上、雪山线以下的高山草甸中

 
    二、冬虫夏草的历史沿革

 

冬虫夏草产于青藏高原地区,藏语称之为雅杂滚卜

由于产地的关系,最早对冬虫夏草的认识和应用见于藏医药南方学派创始人宿喀·娘尼多吉(1439-1476年)所著的《藏医千万舍利》,文中记载:冬虫夏草,生长在偏僻高山,冬季为虫,叶像野韭,花像罗蒂,根秋末像葛缕子。味甘、微涩,性润、温。功效祛风、利胆、益精。其后的藏医药著作也多有所见,松西·益西班觉的《认药白晶镜》中称:冬虫夏草生长在高山,冬季为虫,叶像野蒜,花像阿哇植物,根秋季像藏茴香,功效益精壮阳

冬虫夏草传入内地,最早可追溯到公元前11世纪西周至秦朝,从出土的文物中就发现有以虫草作图案的玉雕饰品。1578年成书的《本草纲目》中记载有雪蚕,根据其生活史、性味功效、形态、环境及产地判断,应当是冬虫夏草的古名。在1694年的《本草备要》中也有关于冬虫夏草的论述,该书载:“(冬虫夏草)甘平,保肺益肾,止血化痰,已劳咳。四川嘉定府所产者佳。冬在土中形如老蚕,有毛能动,至夏则毛出土上,连身俱化为草,这是冬虫夏草在内地最早的文字记载[5]。吴仪洛(1757)在《本草从新》中第一次详尽地记载了冬虫夏草及其药用[7]。赵学敏(1765)著的《本草纲目拾遗》中把它的药用归之为能治百虚百损”[8~10]

关于对冬虫夏草有记载的古医药书籍主要还有:《月王药诊》(亦译《医法月王论》)、《藏本草》、《图鉴》、《吾三卷香》、《金汁甘露宝瓶札记》、《寿世保元》、《本草二经》、《黔囊》、《本草问答》、《药性考》、《本草再新》、《柑园小识》、《四川通志》、《本草**怠贰ⅰ陡倌渴耙拧贰ⅰ段姆克量肌贰ⅰ侗静菡濉贰ⅰ吨厍焯盟姹省返,它们对冬虫夏草的形态\功能等均有描述.

古代名家笔记或随录中也偶见对冬虫夏草产地、习性、功能及采集等的描述。如:地方志《四川通志》、秦武域的《闻见辩香录》、   袁栋的《书隐丛谈》、李心衡的《金川琐记》、 陈箔的《横涩轩丛牍》、纪晓岚的《姑妄听之》、徐昆的《柳崖外编》、 擅萃的《滨经》、齐学袭的《见闻续笔》、王培荀的《听雨楼随笔》等。

对于虫草菌的学术研究,是从中国冬虫夏草传到西方开始的。 明代中叶1400—1465年间就从浙江传到日本,并在贵族中广泛食用;1723年,由欧洲传教士尚加特利茨库把中国的虫草带到法国,1727年,冬虫夏草被收入巴黎科学院院士会议纪要。以后陆续有标本输往意大利、日本以及欧洲其它国家和地区,引起学者们的极大兴趣[11]1843年,英国真菌学鼻祖Berkeley将中国的冬虫夏草定名为Sphaeria sinesis1878年,意大利学者Saccardo将我国的冬虫夏草的学名定为Cordyceps sinensis(Berk)Sacc,意指中国虫草。从此,冬虫夏草的研究在国外引起重视,中国虫草也开始驰名于世[1213]

我国七十年代初期以前,对冬虫夏草的研究进展相对缓慢。七十年代后期以来,在对冬虫夏草的资源开发利用、综合性研究、有效成分的提取、代用品的选择和人工、半人工栽培等领域的科研遍及全国,冬虫夏草及其人工培养物制剂已广泛用于临床,取得较好的效益[14]

 

三、 虫草的种类和分布

 

虫草属是一个大家族,包括了所有寄生于昆虫、蛛类、大团囊菌或麦角菌上长出子坐并形成子囊孢子的真菌。

 

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大团囊菌

 

 

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蟋蟀虫草
                      

据日本学者小林义雄等(1983)记载报道,虫草属全世界有260种,资源较清楚的有139种,我国有58[15]。目前报道虫草属真菌已达约400种,我国已记载的有108种左右[6]。除冬虫夏草外,还有如蝉花、亚香棒虫草、绿虫草、珊瑚虫草、鳞翅目虫草等[9]

 

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蝉花

 

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珊瑚虫草

虫草在世界各地均有分布。蛹虫草为世界广布种,分布地域遍及世界;椿象虫草和吹泡虫虫草主要分布于日本;罗伯特虫草、亨利虫草为大洋洲特有种;冬虫夏草为中国青藏高原高山雪域的特有种。

 

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蛹虫草

 

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椿象虫草
 

每种虫草的寄主各不一样,大体上一种虫草只有一种或一群寄主。例如冬虫夏草的寄主是虫草蝙蝠蛾幼虫,棒行虫草(Cordyceps clavlata)的寄主是介壳虫,瘤座虫草(Cordyceps tuberculata)的寄主是松天蛾(Sphinxpinasti)、蚁、蝇。但也有少数种类虫草,其寄主可达数十种之多,例如椿象虫草(Cordyceps barnessi)[9]

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蚂蚁虫草

 

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黄蜂虫草
                 

在国内外一些人和学者的概念中,把凡是由虫草属真菌寄生并能产生子座的菌物结合体通称冬虫夏草,这是错误的。中国传统的中医药学和我国绝大多数学者和人们所指的冬虫夏草,是特指仅分补于我国青藏高原、云贵高原及边缘地区高寒草甸的中国被毛孢真菌寄生于蝙蝠蛾属的虫草蝙蝠蛾(Hepialu sarmoricamus oberthur)等昆虫幼虫后形成的复合体。而其他种类的虫菌复合体只能叫虫草,不能称为冬虫夏草

 

四、冬虫夏草的分类地位

 

明确冬虫夏草的分类地位,就是要区分虫草种类、探索不同虫草间的亲缘关系、阐明生物界自然系统,帮助人们认识和鉴定出什么是真正的冬虫夏草。

生物分类包括两种方法:一种是人为分类法,即按照人们主观意志拟订的或者依照外表上看到的一些标准加以系统排列的分类方式;第二种是自然分类法,即按生物亲缘关系远近为主进行的分类方式。冬虫夏草开始采用的是第一种分类方式。

我国青藏高原特有的冬虫夏草是最早被引进学术界的虫草属真菌,1727年被刊登于法国科学院的学术纪要上;1843年,Berkeley发表冬虫夏草学名Sphaeria sinensis Berk.;1833年,H.F.Link正式发表虫草属CordycepsFr..Link,此名沿用至今。我国学者在进入20世纪后才开始用现代方法研究真菌的起源,1980年成立了中国真菌学会,之后中国药用真菌分会相继建立。

由于虫草属具有特殊的线形子囊孢子、长棒状的子囊,加之又寄生于昆虫、蛛类或其他真菌上并形成子坐,这与麦角真菌的形态习性大致相似,因此早期学者将其归属于广义的麦角菌目之下。

全世界已知的虫草属真菌有400余种,中国记载的约有120多种,冬虫夏草仅虫草属中的一个种。传统上虫草属的分类标准就是根据寄主上长出子坐的显著特征,再区分其子坐、子囊、子囊包子的形态结构及真菌的寄主、分布区域为依据而划分的。

20世纪80年代后,DNA分子生物学技术被应用于遗传鉴定,发现按形态学划分的虫草属并不是同一个祖先的后代,综合亲缘性对虫草属的分类进行了调整。冬虫夏草菌在现行分类系统中的分类地位为:

     
界:
真菌界 Fungi
亚界:

双核亚界 Dikarya

门:

子囊菌门 Ascomycota

亚门:

盘菌亚门 Pezizomycotina

纲:

粪壳菌纲 Sordariomycetes

目:

肉座菌目 Hypocreales

科:

蛇形虫草科 Ophiocordycipitaceae

属:

蛇形虫草属 Ophiocordyceps

种:
中华虫草 O. sinensis
 
 
 

五、现代药典中的冬虫夏草

 

2010版《中华人民共和国药典》有关冬虫夏草的内容为:冬虫夏草(Dongchongxiacao CORDYCEPS

本品为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps.sinensis(Berk.)Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座和幼虫尸体的干燥复合体。夏初子座出土、孢子未发散时挖取,晒至六七成干,除去似纤维状的附着物及杂质,晒干或低温干燥。

【性状】本品由虫体与从虫头部长出的真菌子座相连而成。虫体似蚕,长35cm,直径0.30.8cm;表面深黄色至黄棕色,有环纹2030个,近头部的环纹较细;头部红棕色;足8对,中部4对较明显;质脆,易折断,断面略平坦,淡黄白色。子座细长圆柱形,长47cm,直径约0.3cm;表面深棕色至棕褐色,有细纵皱纹,上部稍膨大;质柔韧,断面类白色。气微腥,味微苦。

【含量测定】照《高效液相色谱法检验标准操作程序》测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(pH6.5)[0.01molL磷酸二氢钠68.5ml0.01molL磷酸氢二钠31.5ml,混合(pH6.5)]~甲醇(8515)为流动相;检测波长为260nm。理论板数按腺苷峰计算应不低于2000

对照品溶液的制备取腺苷对照品适量,精密称定,加90%甲醇制成每1m120μg的溶液,即得。

供试品溶液的制备取本品粉末(过三号筛)0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入90%甲醇10ml,密塞,摇匀,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用90%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l0μl,注入液相色谱仪,测定,即得。

本品含腺苷(C10H13N5O4)不得少于O.010%。

【性味与归经】甘,平。归肺、肾经。

【功能与主治】补肾益肺,止血化痰。用于肾虚精亏,阳痿遗精,腰膝酸痛,久咳虚喘,劳嗽咯血。

【用法与用量】39g

【贮藏】置阴凉干燥处,防蛀。

 

六、真假天然冬虫夏草的辩别

 

(一)、辨别真假冬虫夏草的基本知识

要辨别天然冬虫夏草,首先必须要搞清楚冬虫夏草的概念。根据虫草的分类知识,虫草为虫草属所有品种的总称,世界上有400余种,我国有120种左右,冬虫夏草为虫草属中的一个种,因此冬虫夏草可像虫草属所有其他品种一样简称为虫草,但不能反过来将虫草叫做冬虫夏草。现在由于冬虫夏草价格昂贵,市场上很多商家故意混淆概念,将不是冬虫夏草的虫草产品叫做冬虫夏草,以假乱真。

其次,要掌握冬虫夏草具有其他虫草不具备的三个特点。这三个特点分别是:一、冬虫夏草真菌为唯一的中国被毛孢;二、寄主昆虫只为鳞翅目的蝙蝠蛾幼虫;三、只生长于青藏高原地区。因此,可以肯定的说,只要证实菌种不是中国被毛孢真菌的不是冬虫夏草,寄主不是蝙蝠蛾幼虫的不是冬虫夏草,不是产于青藏高原的不是冬虫夏草。

再次,要熟悉冬虫夏草的外形特征、色泽、味道等,通过感官进行辨别。

感官辨别主要是看冬虫夏草的虫体子座的一些特征:

冬虫夏草的虫体部分看上去很像家蚕,长3-5厘米,直径0.3-0.8厘米;全身有8对足,前面3对、中间4对、后面1对,其中以中部的4对最明显,这是冬虫夏草的一个显著特征。虫体头部近头半厘米处颜色有变化,呈黄红色,表面为深黄色至黄棕色。背部有二三十个明显的环纹,近头部的环纹较细,身体部环纹以3环为一组,环纹间隔明显,这也是鉴别真假的一个重要方面。尾部像蚕尾,向内钩。气味微腥,闻起来有一股香菇草味,这也是虫草的特殊味道。

冬虫夏草的子座也很有特点:只有一条子座,是细长的圆柱形,长4-7厘米,直径约0.3厘米,基部将虫体头部完全包裹。子座的表面是深棕色至棕褐色的,有细细的纵向皱纹,上部稍为膨大,顶端较尖,可分为柄部、可孕部和不孕部三部分。质地柔韧,折断面纤维状,断面类白色。气微腥,味微苦。

总体上,可从以下几个要点对冬虫夏草进行鉴别:腹部的4对足异常明显;近头半厘米处颜色有变化;环纹明显,以3环为一组;环纹间隔明显;子座基部将虫体头部完全包裹;子座顶端较尖。

 

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第四、通过对样品破坏性试验进行鉴别(引自虫草产地直销网)。

1.将冬虫夏草用开水泡,真虫草用开水浸泡后,虫体变膨大而软,虫体颜色基本不发生变化,菌座色加重成为黑褐色,虫体和菌座相连不脱落,水质澄清不混浊,水的颜色呈淡黄色,通常水中不会有沉淀物,就算有也只是从虫草上脱落下来的很少量泥土与木屑。假虫草用开水浸泡10分钟后,会开始现出原形,原先虫体外的黄色开始脱落,菌座如果是假的也开始脱落与虫体分开,虫体可能会变成植物根茎、地蚕、僵蚕体,菌座黑褐色颜色慢慢的会退掉,水的颜色会出现异常,水质可能会变混浊,水中还可能有较多的沉淀物。
2.
把冬虫夏草的虫体部分折断(最好是从中间折断),看断面颜色是否为白色,是否有一个类似“V”字型的黑芯(黑色或深或浅,为幼虫消化道的残迹),黑芯呈线条状(线条或粗或细),虫草断面是白色且除有类似“V”字型黑芯外再无其他东西的是真虫草,否则是假虫草。关于虫草断面我们特以那曲冬虫夏草为例展示如下:

 

最简单最方便冬虫夏草真假鉴定鉴别方法,真假真伪虫草辨别方法技巧,最简易最简便可行的真假冬虫夏草辨别技术

 

目前,冬虫夏草人工培养没有成功,所有真的冬虫夏草均为天然冬虫夏草。

 

(二)、常见的冬虫夏草掺假欺骗方法

 1、用野生于湖南、广西、江西、安微等地虫草属的亚香捧虫草和新疆虫草等掺假,冒充正品冬虫夏草销售。很多种低海拔地区的虫草保健功能弱且毒性大,不宜做中药材使用。

2、用面粉、玉米粉、淀粉、石膏等材料,用特制造假虫草摸具压成模型,然后上色晾干,冒充正品冬虫夏草销售。

3、用人工培育的虫草菌丝体,做成营养补品,冒充纯天然野生冬虫夏草营养补品。人工、天然虫草两者虽然有一些药理成份相似,但并不是同一种药物。

4、在正品冬虫夏草中加入明矾等无机盐以增重掺假,由于掺假者把冬虫夏草在明矾里浸泡过,使草体表面有一层乳白色,起凝固、膨松、增重作用。

5、在虫草幼虫部分的体内穿入铁丝、竹签等以增加重量。值得注意的是,天然虫草在采挖过程中会出现一定比例的折断,因虫草非常昂贵,药农会用草梗将其穿在一起,为了卖相好,这是正常现象,但其所占比例小、份量轻且不影响药性,完全可以与那种人为的故意欺骗做法区别开来。

6、将经水煎或酒精浸提过的冬虫夏草烘干再当冬虫夏草卖。此类产品只具冬虫夏草的形状,已没有功能。鉴别方法是将虫体掰断,断面不是白色而是黄色

7、用湿度较大的虫草进行欺骗。消费者购买虫草时一定要注意干湿度,因冬虫夏草是贵重商品,商家一般冷冻储藏,有的不太干消费者不太注意,实际上干透后才发现水分占重很大,往往吃亏上当,一定要买干透的产品。

8、在正宗冬虫夏草中掺入部分外形相似的其他种类的虫草属虫草,最常见的为掺入亚香棒虫草。这种手段让一般消费者真假难辨,防不胜防,尤其网购中常见,消费者一定要注意。

 

(三)、几种冬虫夏草伪品的特点 

目前市面上常见的非正品冬虫夏草,主要有古尼虫草、亚香棒虫草、红头虫草、凉山虫草、香棒虫草、新疆虫草等:

古尼虫草。它有细长的子座,有的分叉,炳白色。因此多挑选子座不分叉的、把虫体染成****、子座染成黑色来冒充。虫体样子虽像蚕,但表面的环纹、腹部4对足都不明显,头黑色,除去菌膜虫体呈黑褐色,这些也是与冬虫夏草相区别的。

 

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古尼虫草
 

亚香棒虫草。虫体也像蚕,头上有棒状或分枝的子座;背部环纹不清晰,可见深色斑点;腹部中间4对足突起不明显。表面显黄褐色,常残留有类白色的菌膜;眼睛常裸露。

 

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市场上染色过的亚香棒错虫草

凉山虫草。虫体似蚕,表面棕褐色,除去菌膜呈暗红棕色。它明显的特征,是拥有细长的子座,像圆柱形,不分枝或上部分枝,不规则弯曲,长10-30厘米,直径约1.5-2.5毫米

 

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凉山虫草
 

香棒虫草。虫体似蛴螬,呈弯曲的扁肾形。短粗,长1.5-2厘米,直径约0.5厘米。表面棕黄色,头较小,有一对螯牙。子座为线形,长2-6厘米,直径约2毫米。身体虽有环纹,但很细密,专业药师一看便知。

 

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香棒虫草
 

新疆虫草。虫体也是蚕状,较细。表面土黄色至紫褐色。气微腥,味苦。由于它没有子座,因此拿它作假的话,通常会在它的头部粘接上蕨类植物的幼叶梗,让它出假的子座,但这种连接一般都不自然。


 

 

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新疆虫草

蛹虫草。蛹虫草为子囊菌亚门,麦角菌目,麦角菌科、虫草属的模式种。学名为Cordycepsmilitaris,又名北冬虫夏草、北虫草等,有部分地区亦称为踊虫草,世界性分布,天然资源数量很少。这是制剂中(如胶囊、片剂)冒充冬虫夏草最多的一种。

 

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人工培养基栽培的蛹虫草 

 

 

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